Esercizi HPLC
Esercizi svolti sulla cromatografia in fase liquida a elevate prestazioni (HPLC)
In questa sezione vengono proposti alcuni esercizi svolti e commentati sulla cromatografia in fase liquida ad elevate prestazioni (HPLC).
Ricordiamo che la HPLC è una tecnica analitica che permette la separazione e l'analisi quantitativa di miscele anche molto complesse in tempi brevi e costi ragionevoli.
La fase mobile è un liquido a bassa viscosità mentre la fase stazionaria, ben impaccata nella colonna, è costituita da microparticelle porose, eventualmente rivestite da una fase legata chimicamente al supporto.
La fase mobile liquida consente di sciogliere le sostanze della miscela da analizzare e pertanto, in HPLC, non è necessaria la vaporizzazione del campione (cosa che avviene invece in GC); ciò consente di lavorare a temperatura ambiente, evitando in questo modo la vaporizzazione del campione e la sua degradazione.
Esercizi sulla cromatografia in fase liquida a elevate prestazioni (HPLC)
1.
Per determinare la concentrazione della caffeina in una bevanda energetica, 50 mL del campione vengono concentrati a 5 mL e analizzati in HPLC. Si ottiene un picco di area A = 1800 unità arbitrarie (u.a.).
Nelle stesse condizioni operative una soluzione standard di caffeina (10 mg/L) ha fornito un picco di area A = 2400 u.a.
Si determini la concentrazione della caffeina nella bevanda energetica.
Lo svolgimento dell'esercizio lo trovi qui: concentrazione della caffeina in una bevanda energetica.
2.
Per l'analisi di tre componenti (A, B, C, non meglio specificati) presenti in un'acqua di scarico, si utilizza la cromatografia in fase liquida a elevate prestazioni (HPLC).
Allo scopo si prepara una soluzione standard a 5 ppm delle tre sostanze A, B e C.
L'analisi in HPLC, di tale soluzione, fornisce i seguenti risultati:
Calcolare la risoluzione tra i picchi.
200 ml del campione si estraggono con un opportuno solvente organico. L'estratto viene poi concentrato fino a 20,0 mL ed analizzato in HPLC nelle stesse condizioni sperimentali. Si ottiene un picco con tR = 522 s e area = 3920 unità arbitrarie.
Indicare se si tratta del composto A, B o C e determinare la sua concentrazione nel campione espressa in mg/L.
Lo svolgimento dell'esercizio lo trovi qui: analisi di un'acqua di scarico tramite HPLC.
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