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Analisi di un'acqua di scarico tramite HPLC

Analisi di un'acqua di scarico tramite HPLC: esercizio

Per l'analisi di tre componenti (A, B, C, non meglio specificati) presenti in un'acqua di scarico, si utilizza la cromatografia in fase liquida a elevate prestazioni (HPLC).

Allo scopo si prepara una soluzione standard a 5 ppm delle tre sostanze A, B e C.

L'analisi in HPLC, di tale soluzione, fornisce i seguenti risultati:

Analisi acqua tramite HPLC

Calcolare la risoluzione tra i picchi.

200 mL del campione si estraggono con un opportuno solvente organico. L'estratto viene poi concentrato fino a 20,0 mL ed analizzato in HPLC nelle stesse condizioni sperimentali. Si ottiene un picco con tR = 522 s e area = 3920 unità arbitrarie.

Indicare se si tratta del composto A, B o C e determinare la sua concentrazione nel campione espressa in mg/L.

Svolgimento dell'esercizio

La risoluzione (RS) viene calcolata tra due picchi adiacenti ed è espressa dal rapporto tra la distanza tra i due picchi (= differenza dei tempi di ritenzione) e la semisomma delle rispettive larghezze alla base del picco, ovvero:

Formula della risoluzione

Calcoliamo la risoluzione tra il picco della sostanza A e il picco della sostanza B:

Risoluzione tra A e B

Calcoliamo la risoluzione tra il picco della sostanza B e il picco della sostanza C:

Risoluzione tra B e C

Dall'analisi di un campione di acqua si ottiene un picco con tR = 522 s e area = 3920 unità arbitrarie.

Dal confronto dei tempi di ritenzione possiamo supporre che si tratti della sostanza B (l'analisi in HPLC della soluzione standard ha infatti fornito per la sostanza B un tempo di ritenzione di 520 s).

Per determinare la concentrazione della sostanza B nei 20,0 mL confrontiamo l'area del picco del campione a concentrazione incognita con quella del picco della soluzione a concentrazione nota (taratura diretta). Impostiamo pertanto la seguente proporzione (u. a. = unità arbitrarie, unità di misura dell'area dei picchi):

5 ppm : 3260 u.a. = X : 3920 u.a.

Da cui:

X = 5 · 3920 / 3260 = 6,01 ppm

Pertanto la concentrazione della sostanza B nei 20,0 mL è pari a 6,01 ppm ovvero a 6,01 mg/L.

Nei 200 mL la concentrazione della sostanza B sarà 10 volte inferiore e pertanto corrisponderà a 0,601 mg/L.

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